第一节 病毒性肝炎病原学指标测定

ELISA法：阳性。

ELISA法：阳性。

HBV首要通过血液路子传播，也可通过母婴等路子传播。普通机体传染HBV后产生3种抗原抗系十足：HBsAg和乙型肝炎大要抗体(抗HBs)、HBeAg和乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、HBcAg和乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)。

HEV为20面对称体球形颗粒，直径27~34nm，是一种无包膜RNA病毒，在核苷酸和氨基酸程度高度同源性的根本上，具大鼠等植物平分离到HEV样病毒，提示HEV为人畜共患疾病。

拜见抗HAV抗体测定中EUSA法。

HBcAg是位于HBV的核心部分，首要存在于被传染肝细胞的细胞核内，游离HBcAg在血清中含量极少，检测比较烦琐，普通不作为通例测定。抗-HBc是针对HBcAg而产生的非庇护性抗体，首要包含抗HBc-IgM、抗HBc-IgG、抗HBc-IgA等三型，目前临床常检测总抗-HBco

血清HBV-DNA荧光定量PCR测定

乙型肝炎病毒核心抗体，抗-HBc(hepatitis B virus core anti-body，HBcAb)

抗HAV抗体测定(anti-hepatitis A virus，anti-HAV）

2．要重视hook效应，即标本含量太高时，因为抗原一抗体比例分歧适，易呈现假阳性成果。

HDVAg：HDV急性传染初期呈现，但很快降落，普通1~2w即难以检测到；慢性传染患者血清中HDVAg可持续阳性。短期内阴转预后较好，持续阳性表示肝侵害严峻，预后欠佳。

抗HCV-IgM的检测影响身分较多，如球蛋白、类风湿因子等，稳定性不如抗HCV-IgG。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法。

3．抗心律变态药物，如普鲁卡因胺、肼苯达嗪，异烟肼，苯妥英钠，保泰松等药物可引发假阳性。

HBsAg存在于HBV的外壳，是一种糖蛋白，为大、小球形颗粒和管状颗粒所共有。HBsAg的抗原性较庞大，采取血清学体例分类古有5种分歧的抗原表位，别离为a、d、y、w、r'此中a属于特同性共同抗原决定簇。目前已知有10种亚型，最常见的首要有adr、adw、ayw、ayr等4种，各亚型漫衍有较着的地区性，我国长江以北 以adr为主，长江以南以adr和adw为主，新疆、西藏、内蒙古等少数民族地区首要为ayw，是以HBsAg亚型对乙型肝炎风行病学调查和防备有必然意义。

4．洗涤次数要恰当，制止洗涤不完整致假阳性或洗涤过量致假阳性，要严格遵循试剂盒申明书要求停止操纵。

Pre-S2阳性提示病毒复制活泼，具有感染性；抗Pre-S2抗体是HBV的中和抗体，阳性时表示病情好转，较早呈现是预后杰出的目标，特别是对于急性乙肝的预后有首要意义。

ELISA法：阳性。

抗-HBs是机体针对HBsAg产生的一种庇护性抗体，表白对HBV具有必然免疫力。普通环境下，抗-HBs在HBsAg消逝后呈现，多为IgG，少数患者中有IgM，是疾病规复的开端，可持续多年，其滴度与特同性庇护感化相干。

丁型肝炎病毒抗原测定(hepatitis D virus antigen．HDVAg)和丁型肝炎病毒抗体测定(hepatitis D virus antibody，anti-HDV)

乙型肝炎病毒e抗体，抗-HBe(hepatitis B virus e antibody， HBeAb)

HBV属于有包膜的嗜肝DNA病毒科，血循环中与HBV有关的颗粒从形状上起码可分为三类：1小球形颗粒并非完整的HBV，而是病毒的外壳（或称包膜），由脂蛋白构成，是乙型肝炎大要抗原(HBsAg)的首要成分，HBsAg因为在肝细胞内参与装配Dane颗粒后多余，游离于外周血，本身无感染性。2管形颗粒实际为一串聚合的小球形颗粒，直径与小球形颗粒附近，具有HBsAg特性。

2．HBV-DNA与抗-HBs HBV传染规复期抗-HBs呈阳性，血清HBV-DNA -般为阳性，但少数患者特别是在肝构造HBV-DNA含量很高时，也可为阳性，提示体内HBV尚未完整被断根。

抗-HBe是在HBeAg消逝后，机体所产生的一种非庇护性抗 体，抗-HBe阳转表示病毒复制多处于静止状况，但并不代表病毒 复制停止或无感染性，20%~50%患者仍可检测到HBV DNA。部分 患者能够因为前C区基因变异，导致不能构成HBeAg而至，普通环境下抗- HBe和HBeAg不会同时存在。抗- HBe呈现早于抗-HBs，检出抗-Hbe提示感染性较着降落或相对降落。

ELISA法：阳性。

2．HBeAg阳性常见于HBsAg阳性者，患者血清中含有较多的 HBV颗粒，因为HBeAg与HBV DNA密切相干，是以是HBV复制 活泼且有较强感染性的标记；HBeAg持续阳性的乙肝患者易转为 慢肝，HBeAg和HBsAg同时阳性的妊妇可产生HBV母婴垂直传 播。

血清HBV-DNA检测成果与乙肝五项目标的干系：

ELISA法：阳性。

荧光定量PCR法：<l.Ox103拷贝/ml。

抗HBc-IgM是传染HBV后，血中最早呈现的特同性抗体。急性期滴度降低，是诊断急性乙肝、判定病毒复制活泼及具有强感染性的目标；别的抗HBc-IgM阳性还见于慢活肝。抗HBc-IgG在传染HBV后Im摆布开端降低，临床上测定总抗-HBc首要反应的 是抗HBc-IgG程度，高滴度表白HBV正在传染与复制；低滴度则表白既往传染，体内持续时候长，具有风行病学意义。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法。

乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen．HBeAg) HBeAg位于HBV的核心部分，是一种可溶性抗原，由传染的 肝细胞分泌入血，在血中可游离存在。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法。

1．HBV-DNA与HBsAg 普通HBsAg阳性时，HBV-DNA常阳性；但在HBsAg含量极低采取ELISA法检测不出时，能够会呈现HBsAg阳性而HBV-DNA阳性的环境；或是患者正处于HBV传染初期，机体乙肝五项标记物尚未产生，但因为PCR检测具有极高的活络度，HBV-DNA含量很低也可检出。

ELISA法：阳性。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法。

乙型肝炎病毒大要抗原(hepatitis B virus surface antlgen，HBsAg)

1．ELISA法影响身分较多，标本要制止溶血，因红细胞中含有 过氧化物酶，红细胞裂解后形成标本溶血，易形成假阳性。

HBsAg -般在传染HBV后1~2m内呈现于血清中，短时在2w内即能够检出，可保持数周、数月、数年乃至耐久照顾。HBsAg固然本身不具有感染性，但因为其常与HBV同时存在，是以HB-sAg阳性经常被用作感染性的标记之一。HBsAg阳性见于乙肝暗藏期和急性期、慢迁肝、慢活肝、肝硬化、肝癌、慢性HBsAg照顾者等。血清HBsAg仅为HBV传染的标记，不反应有无复制、复制程度、感染性强弱及预后等环境。

抗-HBs和HBsAg可同时呈现在HBV传染规复期，此时 HBsAg尚未消逝，而抗HBs已产生；或是s区基因产生变异，野株 抗-HBs不能将此中和断根；或是抗-HBs阳性者传染了免疫逃逸 株。HBsAg、抗-HBs和抗-HBc同时存在多见于发作性肝炎患者。

1．急性HBV传染时HBeAg呈现稍晚于HBsAg，消逝先于 HBsAg，耐久存在提示病情趋于慢性化。在慢性HBV传染时 HBeAg是首要的免疫耐受因子，大部分环境下HBeAg存在表示患 者处于高传染低应对状况。

HDV是一种缺点的单股负链RNA病毒，呈球形，其复制需依靠于HBV的存在，包含以HBsAg作为外壳，核心为HDVAg和HDV-RNA，只要与HBV共存才气传染患者。HDVAg是HDV独一 的抗原成分，是以仅一个血清型，刺激机体所产生的抗HDV不是庇护性抗体。临床诊断HDV传染首要根据为血清HDAg、抗HDV-IgM、抗HDV-IgG测定。

ELISA、法：阳性。

PCR技术活络度很高，可因为尝试操纵不当、尝试室设置不标准、消毒措置不完整、标本汇集分歧适要求等形成净化，导致成果 呈现假阳性。是以必须严格遵循PCR尝试室要求停止操纵，采血利用一次性试管，标本室温安排不能超越6h，所用物品必须高压灭菌等。血清HBV-DNA测定是评价HBV传染和复制最直接、最活络、最特异的目标，也是察看乙肝患者有无感染性最可靠的体例。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法。

抗HDV-IgM：抗HDV-IgM呈现较早，但持续时候较短，用于急性传染初期诊断；抗HDV-IgG：只能在HBsAg阳性患者中检出，是诊断慢性HDV传染的可靠目标，急性期时滴度低，慢性传染滴度高，且HDV被断根后仍可持续多年。堆叠传染HBV和HDV时，常表示为抗HBc-IgM阳性、抗HDVlgM和抗HBclgG阳性，提示患者能够生长为肝硬化，且停顿快。

3．HBV-DNA与HBeAg、抗-HBe、抗-HBc HBeAg阳性时HBV-DNA几近全数为阳性；HBeAg阳性、抗-HBe和抗―HBc阳性时，申明HBV复制减弱，其HBV-DNA阳性检出率仍可高达80%，患者具有感染性。

目前已肯定的病毒性肝炎病原体有5种，即甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)、丁型肝炎病毒(hepatitis Dvlrus，HDV)、戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)、除HBV为双链DAN病毒外，其他均为单链RNA病毒。

急性期患者血清中可检出抗HEV-IgM，持续2~3m；规复期可检出抗HEV-IgG，持续约1y，提示戊肝病后免疫不能耐久。戊肝为自限性疾病，普通不会转为慢性，但一部分患者，特别是怀胎期若归并戊肝时，易生长为重症肝炎，可导致流产或灭亡，病死率高达20%―30%。HBV传染者堆叠传染HEV也易生长为重症肝炎。

抗HBs阳性见于既往传染HBV现已规复，且对HBV有必然免疫力，接种乙肝疫苗后，仅呈现单项抗-HBs阳性；被动性获得 抗-HBS抗体，如注射特同性Ig或输血等。

Pre-S1是HBV外膜蛋白成分，凡是连接在Pre-Sz蛋白的氨基末端，Pre-Si第21~47位氨基酸为肝细胞膜受体．HBV可通过此受体黏附于肝细胞膜上，而进入肝细胞。Pre-Si抗原性较强，可刺激机体产生抗Pre-Si抗体。

抗HCV分为抗HCV-IgM和抗HCV-IgG，均为非庇护性抗体，目前临床上检测的为总抗体，抗HCV阳性便是HCV传染的首要标记。抗HCV-IgM阳性见于急性HCV传染，普通持续1―3m，是诊断HCV初期传染、病毒复制和感染性的目标，若持续阳性则提示病情易转为慢性；抗HCV-IgG呈现晚于抗HCV-IgM，抗HCV-IgG阳性表示体内有HCV传染，但不能作为初期诊断目标，低滴度抗HCV-IgG提示病毒处于静止状况，高滴度提示病毒复制活泼。

血清中抗HAV-IgM在病发1~2w内呈现，3m后滴度降落，6m后则不易测出，抗HAV-IgM阳性已被公以为是初期诊断甲型肝炎的目标。抗HAV-IgG呈现较抗HAV-IgM稍晚，可耐久或毕生存在，抗HAV-IgC阳性表示既往传染，但体内已无HAV，是一种庇护性抗体，可用于检测机体或注射甲肝疫苗后是否具有对HAV的免疫力以及风行病学调查。

HAV属于小RNA病毒科，为嗜肝RNA病毒，在体内首要在肝细胞内停止复制，通过粪一口路子传播，多数学者以为HAV不存在慢性照顾状况。

ELISA法：阳性。

抗丙型肝炎抗体(anti-hepatitis C virus，anti-HC)

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)属于黄病毒科丙型肝炎病毒属，是一种直径为30～60nm的球形颗粒，外有脂质外壳、囊膜和棘突布局，内有由核心蛋白和核酸构成的核衣壳。

2．抗-HBe阳性常伴抗-HBc阳性，检出率在慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者有逐步递增的征象，提示多数患者HBV传染时候较长。

Pre-S1阳性提示病毒复制活泼，具有较强感染性；抗Pre-S1抗体是HBV的中和抗体，机体较早呈现表示预后杰出。抗Pre-S1抗体阳性见于急性乙肝规复期，提示HBV正在或已被断根。

乙型肝炎病毒大要抗体／抗-HBs (hepatitis B virus surface antibody．HBsAb)

戊型肝炎病毒抗体测定(anti-hepatitis E virus，anti-HEV) HEV是引发肠道传播的戊型肝炎之病原体，传播体例及临床表示与甲肝类似，首要风行于亚洲、非洲、墨西哥等国度和地区，常通过饮用被净化的水源而导致戊肝发作风行，散病发例漫衍于天下各地。

除此以外还用于乙肝患者抗病毒药物的疗效察看、献血员筛查、血液成品及乙肝疫苗安然性评价。

HBV前S2(Pre-S2)和抗前S2抗体(anti-Pre-S2)

Pre-S2是HBV外膜蛋白成分，其C末端直接与HBsAg的N末端相连，Pre-S2N端109~133位氨基酸为聚合人血明净蛋白受体，可与聚合人血明净蛋白连络。人肝细胞膜上也有聚合人血明净蛋白受体，是以HBV可通过病毒受体一聚合人血明净蛋白一肝细胞膜受体黏附于肝细胞膜，成为HBV侵入肝细胞的首要布局组分之一。 Pre-S2蛋白抗原性较强，刺激机体可产生抗Pre-S2抗体。

ELISA法：阳性。

3大球形颗粒即完整的HBv，又称为Dane颗粒，由外壳和核壳构成。核壳内古有环状双股DNA、DNA多聚酶、核心抗原(HBcAg)、e抗原(HBeAg)等，是病毒复制的主体。

ELISA法：阳性。

乙型肝炎病毒(HBV)病原学目标测定

HBV前S1(Pre-S1)和抗前S1(anti-Pre-S1)抗体

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法

1．抗-HBe呈现的快慢与肝炎转归有关。在乙肝急性期呈现抗-HBe，易生长为慢性乙肝；慢性活动肝炎呈现抗-HBe能够停顿为肝硬化；若HBsAg阳性伴随抗-HBe，且ALT降低，须重视原发性肝癌的能够性。

ELISA法：抗HAV-IgM阳性；抗HAV-IgG阳性或阳性。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法，别的因为抗HBc-IgM的检测受类风湿因子影响较大，低滴度抗HBc-IgM时，应重视辨别是为假阳性。

拜见抗HAV抗体测定中ELISA法。